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Evaluación de muestras de aceite de ricino para detectar una potencial contaminación con toxinas

biodegradación y por lo tanto es posi- recipientes descartables contaminados
· Abreviaturas ble que persista en el medio ambiente. fueron remojados en hipoclorito al 3 %
durante 24 horas para descontaminarlos
USP Grado farmacéutico de los Para abordar la inquietud expresada antes del lavado o la disposición.
EE.UU. [3], evaluamos muestras de aceite de
PBSB Solución salina tamponada ricino en distintas etapas de procesa-
con fosfato conteniendo miento, utilizando una técnica ELISA ELISA
0,05 % de albúmina sérica altamente sensible para determinar si
bovina había presencia de ricina.
ELISA Ensayo inmuno-absorbente Nota del Editor: ELISA son las siglas
ligado a enzimas por las que se conoce al ensayo por
pAb Anticuerpo policlonal de · Materiales y Métodos inmunoabsorción ligado a enzimas (en
cabra anti-ricina inglés enzyme-linked immunosorbent
RCA Aglutinina del Ricinus La extracción del aceite de ricino assay). Se trata de una técnica de labo-
communis ratorio que fue diseñada por científi-
BB 3 % albúmina sérica vacuna El aceite de ricino prensado en frío y cos suecos y holandeses en 1971, que
(BSA) en TBST: solución neutralizado fue un obsequio genero- permite detectar pequeñas partículas
salina tamponada con so del Sr. Fred Hawco (Innoleo LLC, llamadas antígenos, que habitualmente
tris-tween-20 Boca Raton, FL, EE.UU) y el Sr. son fragmentos de proteínas. La iden-
TMB 3,3´,5,5´-tetrametilbencidina Subhash Polara (Royal Castor Products tificación es específica, es decir, consi-
HRP peroxidasa del rábano Ltd., Tal. Sidhpur, Gujarat, India). El gue que pequeños segmentos de proteí-
aceite de canola y los aceites de canola nas destaquen y no puedan ser confun-
y ricino de grado USP (Vi-Jon, Smyr- didas con otras.
ciones de consumo para el aceite de na, TN, EE.UU.) fueron adquiridos
ricino y sus derivados, incluyendo la localmente. Se extrajeron muestras de Para poder identificar los antígenos se
producción de laxantes, lápiz labiales, aceite (1 ml) por agitación vorticial con utilizan moléculas con dos componen-
cosméticos, desodorantes, compuestos 1 ml de solución salina tamponada con tes acoplados: un anticuerpo (que se
antimicóticos y chocolate [2]. Recien- fosfato, conteniendo 0,05 % de albúmi- une al antígeno de forma específica) y
temente, un artículo en una publicación na sérica bovina (PBSB) y adicionando una enzima (que se activa y señala la
de la industria de los lubricantes plan- cantidades variables de ricina pura (0, unión al antígeno). Antes del descubri-
teó la inquietud de que los productos 1, 10, 100 ng/ml) antes de la extrac- miento del ELISA se utilizaban molé-
del aceite de ricino contienen ricina y ción. Después de la centrifugación para culas radioactivas en vez de enzimas, lo
por ende deberían ser reemplazados separar la emulsión, se extrajo la capa que suponía un riesgo añadido innece-
con aceite mineral [3]. Por lo general, acuosa inferior con una jeringa descar- sario en el laboratorio y un mayor coste.
el procesamiento del aceite de semi- table para realizar un análisis de detec-
lla incluye pasos para la extracción, ción de ricina.
el blanqueo, la desodorización, el fil- Como fuera descrito previamente, se
trado e incluso la destilación al vacío realizó una prueba ELISA [7]. Breve-
para eliminar los esteroles y tocofero- Ricina y anticuerpos utilizados mente, se utilizó una placa de microtitu-
les. Los lubricantes a base de aceite de lación NUNC MaxiSorp (Penfield, NY,
ricino también se encuentran sujetos a La ricina y el anticuerpo policlonal de EE.UU.) que fue recubierta con 100 μl
procesos de hidrogenación y saponifi- cabra anti-ricina (pAb) fueron adqui- de mAb1642 en una concentración de
cación. Como resultado, parece impro- ridos en Vector Laboratories (Burlin- 5 μg/mL en solución salina tampona-
bable que los lubricantes derivados del game, CA, EE.UU.). El anticuerpo da con fosfato y se mantuvo durante
aceite de ricino puedan plantear peligro monoclonal de ratón, mAb1642 (con- la noche a 4 ºC. Después de bloquear
tóxico. Además, un beneficio de los tra la cadena A de ricina), se preparó con 300 μL de solución reguladora de
derivados del aceite de ricino es su bio- como fuera descrito previamente [4]. bloqueo (BB, 3 % de BSA en solución
degradabilidad, incluyendo incluso al Estos anticuerpos detectan la ricina y salina tamponada con tris-tween-20,
propio aceite que se utiliza en motores la aglutinina Ricinus communis (RCA) TBST) a 37 ºC durante 1 hora, la pla-
de dos tiempos, y a la grasa de litio que [5]. La ricina y la RCA son muy tóxi- ca se lavó 2 veces con TBST. Luego
se usa ampliamente en aplicaciones cas. Las precauciones específicas se agregó un juego de estándares de
lubricantes para el hogar, la industria y para el manejo de cualquier cantidad ricina y extractos de aceite de ricino en
los automotores. Por otra parte, el acei- de ricina se describen en la referen- PBSB (100 μL/pocillo) y se incubó a
te mineral es prácticamente inerte a la cia [6]. Los materiales de vidrio y los 37 ºC durante 1 hora. La placa se lavó

A&G 104 • Tomo XXVI • Vol. 3 • 440-443 • (2016) 441