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· S A l U d Y N U T R I C I Ó N ·

Método FRAP derivado de la o-fenantrolina) que forma lógicos como ser acelerador del daño
un complejo 2:1 con Cu que es un cro- endotelial de las células, formar anti-
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El método está basado en la capacidad móforo con un máximo de absorbancia cuerpos específicos, alterar el tono vas-
de los antioxidantes fenólicos de reducir en 490 nm (Prior et al, 2005; Apak et al, cular, inducir factores de crecimiento,
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el complejo Fe -TPTZ (tripiridiltriazina) 2004; Apak et al, 2008). etc. (Gheldof y Engeseth, 2002). Se usa
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a un complejo azul de Fe -TPTZ que se por lo tanto la oxidación de LDL ex vivo
mide a 593 nm. Ventajas: para evaluar la relación de antioxidantes
Da valores comparables con TEAC para dietarios como la vitamina E y las enfer-
El potencial redox del par Fe /Fe es de el caso de los polifenoles. Los azúcares medades cardíacas: se obtiene sangre y
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0,7 voltios y el del ABTS Oxid/ABTS y el ácido cítrico no son oxidados por el se la hace reaccionar con Cu midiendo
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Red de 0,68 v. (de allí la similitud de reactivo por tener menor potencial nor- el periodo de inicio de la reacción antes
este método con el TEAC). mal que Cu /Cu si lo comparamos con de la oxidación de la proteína.
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el par Fe /Fe .
La unidad FRAP se define como la capa- El uso de AAPH es preferible al Cu ya
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cidad de reducción de 1 mol de Fe a Fe 2 El método sirve para los antioxidantes que es más similar a lo que ocurre en los
(Huang et al, 2005). conteniendo grupos tiol mientras que el medios biológicos.
FRAP no sirve para glutatión que tam-
Ventajas: bién es un tiol. Ventajas:
Método simple, rápido, económico, El método mide los tiempos de induc-
robusto. No precisa equipo especial. El reactivo CUPRAC es más estable ción porque es un estudio de la inhibi-
Se lo ha automatizado completamente y accesible como cromógeno que el ción de la autooxidación de los lípidos.
(Prior y col., 2005). ABTS, DPPH, etc. (Apak y col. 2008).
La reacción se hace sobre micelas o en
Desventajas: El método sirve para análisis de rutina y solventes orgánicos. En el primer caso, el
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El Fe es considerado prooxidante, presenta una excelente linealidad. avance de la reacción no puede seguirse
ya que puede reaccionar con el H O directamente en un espectrofotómetro.
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(potencial redox H O /H O de 1,77 vol- El método mide antioxidantes lipófilos e
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tios) originando radical hidroxilo (OH*), hidrófilos. Cuando se usa ácido ascórbi- Hay una buena correlación entre la oxi-
uno de los radicales libres más dañinos co, ácido úrico, ácido gálico y quercetina dación de las LDL usando AAPH y los
en el hombre (Ou et al, 2002, a). como estándares habrá que considerar de valores obtenidos con ORAC.
30-60 minutos de reacción.
El método FRAP no mide glutatión, Desventajas:
importante antioxidante en sistemas Desventajas: Es difícil medir tiempos de inducción
biológicos humanos porque no tiene Algunos problemas con los tiempos de pequeños y además muchos constituyen-
el potencial necesario para reducir el reacción (Prior y col.,2005). tes de los alimentos absorben a 234 nm
Fe a Fe . (Prior y col., 2005).
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Los estándares que usa el método (ácido Métodos que miden la inhibición de la
ascórbico, α-tocoferol, ácido úrico) dan autoxidación inducida en los lípidos Método TBARS (Thiobarbituric Acid
valores similares usando FRAP (Prior y Reactive Species)
Cao, 1999). Están basados en inducir artificialmen-
te la autooxidación del ácido linoleico El producto formado por reacción del
El método no sirve para la unión disul- (C18:2 ω6) como así también de partí- ácido tiobarbitúrico con el malonal-
furo y los grupos tiol, inclusive para las culas de lipoproteínas de baja densidad dehido que se obtiene de la oxidación
proteínas), de allí su no utilización en (LDL) por reacción con un metal de secundaria de los lípidos se mide a 532
el suero. transición como es Cu . También pue- nm (Ohkawa y col., 1979; Janero, 1990;
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de hacerse por descomposición térmica Witz y col.,1986).
de AAPH (un iniciador hidrosoluble de
Uso del catión Cu para determinar R-O *) y peroxidación de los lípidos por Ventajas:
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la capacidad antioxidante (método formación de dienos conjugados que se Metodología muy sencilla.
CUPRAC) leen a 234 nm.
Desventajas:
El potencial normal del Cu /Cu es de La proteína de baja densidad, LDL, oxi- Otros aldehídos reaccionan con el TBA.
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0,15 voltios. Se usa la batocuproína (un dada, tiene importantes efectos fisio- No se puede realizar en vivo porque el
122 A&G 86 • Tomo XXII • Vol. 1 • 118-124 • (2012)