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· I NVESTIGACIÓN Y dESARR ollo ·

Recuperación directa de la Fosfolipasa

A2 secretora a partir del apoplasto* de

la raíz de soja (Glycine max) para su uso

en la industria alimentaria

AUTORES: M. C. MINCHIOTTI y R. R. MADOERy
E-mail: rmadoery@agro.unc.edu.ar
Cátedra de Química Orgánica. Facultad de Ciencias Agropecuarias.
Universidad Nacional de Córdoba. Ciudad Universitaria. C.C. 509 (5000) Córdoba. Argentina.
Trabajo original preparado especialmente para A&G.

Resumen / Abstract

La fosfolipasa A2 de soja (Glycine max) (GmsPLA2) es una Soybean (Glycine max) phospholipase A2 (GmsPLA2)
enzima lipolítica secretora que fue identificada y caracteriza- is a secretory lipolytic enzyme previously identified and
da previamente por los autores. Por su origen vegetal es más characterized by the authors. Because of its plant origin,
selectiva que las microbianas y se encuentra completamente this enzyme is more selective than microbial ones and have
aceptada por las normas alimentarias internacionales para la full acceptance of international food standards for sn-2
producción de sn-2 lisofosfolípidos. Estos lisolípidos son lysophospholipids production. These lysolipids are strong
emulsionantes fuertes con un amplio campo de aplicación en emulsifiers with wide application field in the food industry.
la industria alimentaria. En el presente trabajo, la enzima se In the present work the enzyme was extracted directly
extrajo directamente del apoplasto evitando el procesamien- from the apoplast avoiding the processing of the whole
to de la semilla entera. Una combinación de solución tampón seed. A combination of Tris buffer and calcium chloride
tris y cloruro de calcio mostró el mayor poder extractivo para showed the strongest PLA2 extractive power. The average
la PLA2. La actividad específica promedio (U/mg proteína) specific activity (U/mg protein) developed by the apoplastic
desarrollada por el fluido apoplástico (FA) fue 400 veces más fluid was more 400 times higher than the same parameter
elevada que el mismo parámetro obtenido a partir de homoge- obtained from seed homogenates in a previous work of the
neizados de semilla en un trabajo previo llevado a cabo por los authors. Also, the PLA2 activity recovery (U/g of tissue
autores. Además, la recuperación de la actividad de la PLA2 processed) was 21,3 times higher by extracting directly
(U/g de tejido procesado) fue 21,3 veces superior en la extrac- from the root apoplast. We developed a novelty, simple
ción directa a partir del apoplasto de la raíz. Nosotros desa- and scalable procedure to obtain PLA2 directly from the
rrollamos un procedimiento novedoso, simple y escalable para soybean root apoplast. This approach allowed us to simplify
obtener PLA2 directamente del apoplasto de la raíz de la soja. notably the PLA2 subsequent purification procedure.
Este enfoque nos permitió simplificar notablemente el proce-
dimiento subsiguiente de purificación de la PLA2.

* Nota del editor: Significado de apoplasto: el apoplasto es un espacio extracelular periférico al plasmalema de las células vegetales por el que fluyen agua y
otras sustancias; este transporte se dice que se realiza por la vía del apoplasto. En las raíces llega a representar un 10% de su volumen. En las mencionadas
raíces la ruta del apoplasto a través de la endodermis está impedida puesto que la banda de Caspari, impregnada de lignina y suberina (impermeables), provoca
que el flujo sea a través del citoplasma de las células (es decir, a través del simplasto). La vía del apoplasto transporta sustancias muy diversas, como el dióxi-
do de carbono (que se capta de la atmósfera y que ha de ser transportado al cloroplasto para que intervenga en la fijación del carbono durante la fotosíntesis),
sales minerales (captadas del suelo a través de la raíz) e incluso elementos de respuesta a estrés (por ejemplo, interviene en la resistencia sistémica adquirida a
fitopatógenos).

630 A&G 109 • Tomo XXVII • Vol. 4 • 630-637 • (2017)